METODIZAÇÃO DE UM ENSAIO DE BIOLUMINESCÊNCIA DE ATP PARA DETECÇÃO DA VIABILIDADE DE Mycobacterium tuberculosis EM CULTURA E PARA O SEU POTENCIAL USO EM TESTES DE SENSIBILIDADE A ANTIMICROBIANOS
Nome: MARIANA ABOU MOURAD FERREIRA
Data de publicação: 29/02/2024
Banca:
Nome |
Papel |
|---|---|
| CARLOS GRAEFF TEIXEIRA | Examinador Interno |
| ERICA CHIMARA SILVA | Examinador Externo |
| KENIA VALERIA DOS SANTOS | Examinador Interno |
| MOISES PALACI | Presidente |
| PEDRO EDUARDO ALMEIDA DA SILVA | Examinador Externo |
Resumo: A tuberculose (TB), causada pelo Mycobacterium tuberculosis, continua sendo uma ameaça global à saúde, exigindo métodos diagnósticos mais rápidos e acessíveis. Este estudo explora a aplicação da bioluminescência de ATP como um método fenotípico para detecção de M.tuberculosis. Nosso objetivo foi otimizar o protocolo de bioluminescência de ATP usando o BacTiter-GloTM para M. tuberculosis, investigando o impacto de volumes variados de suspensão bacteriana e reagente na sensibilidade do ensaio, avaliando métodos de extração de ATP, estabelecendo curvas de calibração e elucidando respostas específicas da cepa a agentes antimicrobianos. O estudo variou sistematicamente volumes de suspensão bacteriana e reagente, identificando uma combinação ótima para sensibilidade. Métodos de extração de ATP não apresentaram melhora significativa em relação aos controles, com o congelamento e descongelamento exibindo tendências promissoras. Curvas de calibração revelaram uma correlação linear entre unidades relativas de luz (RLU) e unidades formadoras de colônias(UFC/mL), estabelecendo limites de detecção baixos. Testes antimicrobianos demonstraram respostas específicas da cepa alinhadas a padrões de sensibilidade e resistência. Em conclusão, este estudo otimizou o protocolo de bioluminescência de ATP, destacando seu potencial como método rápido e custo-efetivo para detecção de M. tuberculosis e teste de sensibilidade a antimicrobianos. As descobertas contribuem para o avanço dos diagnósticos de TB e compreensão dos mecanismos de resistência antimicrobiana. Esforços adicionais de refinamento e validação são necessários, prometendo plataformas diagnósticas mais eficientes no futuro.
