Estudo comparativo entre o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das populações total e metabolicamente ativa de Mycobacterium tuberculosis isoladas de amostras de escarro de pacientes com tuberculose pulmonar
Nome: MANUELA NEGRELLI BRUNETTI
Tipo: Dissertação de mestrado acadêmico
Data de publicação: 29/07/2021
Orientador:
Nome |
Papel |
|---|---|
| MOISES PALACI | Orientador |
Banca:
| Nome |
Papel |
|---|---|
| KÊNIA VALÉRIA DOS SANTOS | Examinador Interno |
| LUCILAINE FERRAZOLI | Examinador Externo |
| MOISES PALACI | Orientador |
Resumo: BRUNETTI, M. N. Metodização do isolamento e análise do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das populações ressuscitáveis e metabolicamente ativas de Mycobacterium tuberculosis. Dissertação (Mestrado). Vitória: Universidade Federal do Espírito Santo, 2021. 109 p.
Uma terapia antimicrobiana eficaz constitui um dos maiores desafios no combate à Tuberculose (TB), visto que falhas terapêuticas podem acontecer por diversos motivos. O bacilo causador da doença pode ser encontrado em diversos estados metabólicos em amostras de escarro de pacientes com TB, sendo demonstrado que esses bacilos em estados dormentes são mais tolerantes a algumas drogas e não são visualizados pelos métodos convencionais de diagnóstico, podendo justificar eventuais falhas terapêuticas sem motivo aparente. Esse estudo se propôs a avaliar se o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos da população total (ressuscitável + ativa) de Mycobacterium tuberculosis, isolado de amostras de escarro de pacientes com TB pulmonar se difere do perfil da população metabolicamente ativa. O estudo foi dividido em duas etapas. A primeira consistiu na padronização da obtenção da população total de bacilos por meio da utilização de meio de cultura contendo sobrenadante de cultura líquida de MTB (SN), e da padronização do Teste de Suscetibilidade aos Antimicrobianos (TSA) pelo método de microdiluição em caldo. A segunda etapa testou os métodos padronizados para a obtenção da população total de bactérias utilizando amostras de escarro de pacientes com TB pulmonar e seguindo com a realização do TSA nessas amostras. Nossos resultados mostraram que o meio de cultura líquido 7H9 acrescido de SN foi superior aos demais testados com relação à recuperação de bacilos ressuscitáveis e, com concentração bacteriana suficiente para a realização do TSA de forma direta. Porém, devido à alta taxa de contaminação desse meio, o método indireto foi empregado para a obtenção das populações de MTB, antes do TSA. A adição de SN ao meio de crescimento líquido 7H9, mostrou diminuir o tempo de positivação em até 1,5 dias. O uso da Densidade Ótica como ferramenta de detecção de crescimento em cultura líquida, mostrou-se ser inferior ao sistema automatizado, não possuindo correlação com o crescimento bacteriano. Adicionalmente, nossos resultados mostraram que a etapa de lavagem e o congelamento parece diminuir os fatores inibidores presentes no escarro, através da diminuição da taxa de inibição de crescimento após o congelamento das amostras, porém, não elimina. O uso de SN mostrou, em testes com cepa de referência, que acelera o crescimento de MTB ativa, mas não altera a quantificação bacteriana pela técnica de Número Mais Provável (NMP). O TSA com a população total de bacilos embora apresente valores superiores de CIM em maior frequência não implica na alteração de sensibilidade e resistência na população de pacientes sem tratamento prévio para TB pulmonar. Apesar disso, nossos resultados sugerem que o perfil de suscetibilidade da população total de bacilos comparada à população ativa, do único caso de paciente em tratamento incluído nesse estudo, evidenciou padrões de sensibilidade/resistência possivelmente diferentes nessa população de pacientes, sugerindo a necessidade de novos estudos envolvendo pacientes em tratamento, com suspeita de resistência, falha terapêutica ou recidiva.
