CARACTERIZAÇÃO DO EFEITO ANTIMICROBIANO E ANTIBIOFILME DE CU-FENDIONA E AG-FENDIONA SOBRE CEPAS MULTIRRESISTENTES DE KLEBSIELLA PNEUMONIAE
Nome: GABRIELA SEABRA
Data de publicação: 04/09/2025
Banca:
Nome |
Papel |
|---|---|
| EDSON OLIVEIRA DELATORRE | Examinador Interno |
| QUÉZIA MOURA DA SILVA | Examinador Interno |
| TATIANA DE CASTRO ABREU PINTO | Examinador Externo |
| VALÉRIA DE ALMEIDA | Examinador Externo |
Resumo: As infecções causadas por cepas multirresistentes (MDR) de Klebsiella pneumoniae estão relacionadas a internações prolongadas, maior mortalidade e aumento nos custos do tratamento, representando um desafio global para os serviços de saúde. Estudos do nosso grupo de pesquisa e de colaboradores sugerem que os compostos de coordenação derivados de 1,10-fenantrolina, Ag-fendiona e Cu-fendiona, apresentam um grande potencial como agentes antimicrobianos e antivirulência contra bacilos Gram-negativos. Neste estudo, foram caracterizadas as atividades antimicrobiana e antibiofilme desses compostos frente a cepas MDR de K. pneumoniae. Para investigar os potenciais mecanismos de ação, foi realizada análise proteômica baseada em nanocromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (nanoESI-LC MS/MS). As concentrações inibitória mínima (CIM90) e bactericida mínima (CBM90) foram 50 g/mL (51,81 M) para Cu-fendiona e 12,5 g/mL (19,91 M) para Ag-fendiona. Os ensaios de curva tempo-morte indicaram uma atividade bactericida dos compostos com 3-12 horas de tratamento em combinação com meropenem em concentrações subinibitórias. Na concentração de 0,5 CIM, Ag-fendiona e Cu-fendiona reduziram a formação de biofilme em 28,54% (p = 0,013) e 34,87% (p = 0,008), respectivamente. Cu-fendiona também reduziu o biofilme pré-formado em 45,30% (2X CIM) e 52,57% (4X CIM), enquanto Ag-fendiona levou a reduções de 30,08% e 40,26% nas mesmas concentrações. A virulência das cepas foi avaliada in vivo em modelo de infecção de Galleria mellonella, utilizando concentrações distintas de inóculo (104, 105 e 106 UFC/larva). A cepa NCTC 13368, mais virulenta entre as testadas, foi selecionada para a avaliação do efeito antimicrobiano dos compostos de coordenação em G. mellonella. Utilizando um inóculo de 105 UFC/larva, observou-se uma maior sobrevivência nas larvas tratadas com a combinação de Ag-fendiona (0,5 CIM) + MPM (0,5 CIM) e Cu-fendiona (0,5 CIM) + MPM (0,5 CIM) em relação às larvas infectadas e não tratadas. A análise proteômica identificou 606 proteínas com ao menos um peptídeo único, sendo 23 moduladas por Ag-fendiona e 17 por Cu-fendiona. As proteínas infra-reguladas por ambos os tratamentos incluem a NAD+ sintetase dependente de NH3, uma proteína do replicon RepFiA e a enzima trealose-6-fosfato hidrolase. As proteínas supra-reguladas por ambos os tratamentos incluem uma fosfatase ácida e a proteína de grampo-beta deslizante. Em suma, os compostos modularam proteínas envolvidas na síntese de NAD+, na partição plasmidial, no metabolismo de carboidratos (especialmente trealose) e do DNA e na atividade de óxido-redutase. Esses processos estão relacionados com a formação da cápsula e do biofilme, com o metabolismo e a replicação, fatores importantes para a colonização e nfecção bacteriana. A modulação dessas proteínas pode estar relacionada à atividade antimicrobiana e antibiofilme de Ag-fendiona e Cu-fendiona contra cepas MDR de K. pneumoniae.
